多方權威深入探討
揭示重組膠原蛋白成分檢測核心難題
5月30日(ri)，中(zhong)國生(sheng)物工(gong)程學會(hui)(hui)科創中(zhong)國工(gong)作委員會(hui)(hui)聯合昌平合成生(sheng)物制(zhi)造轉化加速中(zhong)心(xin)舉辦了“復雜基質(zhi)中(zhong)重組膠原蛋白(bai)檢(jian)測(ce)方(fang)(fang)法”研(yan)討會(hui)(hui)。會(hui)(hui)中(zhong)，生(sheng)物醫(yi)藥(yao)、分(fen)析檢(jian)測(ce)、材(cai)料科學等(deng)多領(ling)域專家聚(ju)焦復雜基質(zhi)中(zhong)重組膠原蛋白(bai)的(de)分(fen)離與純化技(ji)(ji)術挑(tiao)戰、高(gao)靈敏(min)度(du)及高(gao)特(te)異(yi)性(xing)檢(jian)測(ce)方(fang)(fang)法的(de)開發(fa)與驗證、標準(zhun)化檢(jian)測(ce)體系的(de)建立與行業監(jian)管需求(qiu)等(deng)主題，解(jie)析技(ji)(ji)術難點(dian)，分(fen)享實踐經驗，并為檢(jian)測(ce)技(ji)(ji)術的(de)優化與相關標準(zhun)的(de)制(zhi)定提供建議。
國(guo)家(jia)蛋(dan)白質(zhi)科學中(zhong)(zhong)心(xin)研究(jiu)員賈辰熙表(biao)示，化(hua)(hua)妝品(pin)中(zhong)(zhong)的重組膠原(yuan)蛋(dan)白檢測相較(jiao)于敷料(liao)類(lei)醫(yi)療器械和生物(wu)樣(yang)本更為復雜。化(hua)(hua)妝品(pin)中(zhong)(zhong)添加了植物(wu)提取(qu)物(wu)、蛋(dan)白質(zhi)、多糖(tang)、脂類(lei)、表(biao)面活性劑及色素等多種成分，會嚴重干擾(rao)膠原(yuan)蛋(dan)白信(xin)號(hao)，導(dao)致檢測時(shi)(shi)其信(xin)號(hao)較(jiao)弱。同時(shi)(shi)，化(hua)(hua)妝品(pin)中(zhong)(zhong)膠原(yuan)蛋(dan)白添加量通常較(jiao)低，對低濃度物(wu)質(zhi)進行(xing)定量檢測難度大(da)。
成分檢測沒有“萬能鑰匙”
方法學驗證是關鍵
目前，針對復雜(za)基(ji)質中重組膠原(yuan)蛋白的(de)(de)檢測(ce)方法(fa)尚未出臺國家統(tong)一(yi)的(de)(de)標準。中國科學院(yuan)過(guo)程(cheng)工程(cheng)研究(jiu)(jiu)所(suo)研究(jiu)(jiu)員張貴鋒(feng)介紹，蛋白檢測(ce)方法(fa)主要有凱(kai)氏(shi)定氮法(fa)、雙縮脲法(fa)、考馬(ma)斯亮藍(lan)法(fa)、福林酚法(fa)、BCA法(fa)及特(te)征(zheng)多肽法(fa)等(deng)。
對于不同的(de)檢測(ce)方法，與會嘉賓紛紛表示(shi)，不同的(de)檢測(ce)方法各有(you)特點，均有(you)其適配的(de)應用場景(jing)，無(wu)關新舊，關鍵是(shi)要(yao)根據不同基質(zhi)(zhi)，建立(li)樣品前處理方法，有(you)效排除(chu)基質(zhi)(zhi)的(de)干擾(rao)，選擇和建立(li)針對復雜基質(zhi)(zhi)的(de)檢測(ce)方法，并(bing)通過方法學驗證其檢出限(xian)、定量限(xian)、線性、精密(mi)度(du)、準確性及檢測(ce)回收(shou)率。
清華大學化(hua)學系教授、中(zhong)國科學院院士李景虹解(jie)釋說，復雜(za)基質中(zhong)重組膠原(yuan)蛋白(bai)的分子檢測(ce)存(cun)在降解(jie)過(guo)程復雜(za)等難(nan)點，不能選用(yong)單一(yi)的檢測(ce)方法，需根據不同(tong)蛋白(bai)的差異性(xing)選擇相應的檢測(ce)方法，并對不同(tong)類型重組膠原(yuan)蛋白(bai)的不同(tong)氨基酸序列、結構包(bao)括(kuo)動態變(bian)化(hua)和(he)相互(hu)作用(yong)進行研究和(he)驗證。
中(zhong)國食(shi)品藥品檢定研(yan)究(jiu)院研(yan)究(jiu)員徐麗(li)明介紹，重組(zu)膠(jiao)原蛋(dan)白產品中(zhong)的(de)復雜(za)(za)基(ji)質是影(ying)響(xiang)成分(fen)檢測的(de)重要(yao)因素。現(xian)行(xing)的(de)標(biao)準化檢測方(fang)法主要(yao)針(zhen)對純蛋(dan)白質樣品，測定方(fang)法在復雜(za)(za)基(ji)質中(zhong)進行(xing)套用時，需(xu)(xu)考慮基(ji)質影(ying)響(xiang)，做好樣品前處(chu)理(li)方(fang)法研(yan)究(jiu)和(he)驗證。“當復雜(za)(za)基(ji)質導致重組(zu)膠(jiao)原蛋(dan)白成分(fen)提取困難(nan)時，需(xu)(xu)要(yao)研(yan)究(jiu)基(ji)質存(cun)在情況下的(de)前處(chu)理(li)方(fang)法，并確保定量用標(biao)品和(he)供試品是相同的(de)檢測條件（基(ji)質環境(jing)），如(ru)基(ji)質加標(biao)的(de)方(fang)式，且需(xu)(xu)通過多種方(fang)法進行(xing)相互驗證。”
北(bei)京師范大學(xue)化學(xue)學(xue)院教授(shou)閆(yan)東鵬指出，為了(le)排除干擾，提(ti)高檢(jian)測的(de)準確性，需要提(ti)供重組膠原蛋白產品前(qian)處理的(de)方法(fa)(fa)，根據不(bu)同應用場景、不(bu)同研究體(ti)系，采用不(bu)同方法(fa)(fa)進行優勢互補。
針對復(fu)雜基(ji)質中(zhong)重組膠原蛋白的檢測(ce)方(fang)(fang)(fang)法(fa)(fa)(fa)，徐麗明建議，可以采用多種方(fang)(fang)(fang)法(fa)(fa)(fa)進(jin)行(xing)考察(cha)，比如(ru)雙縮脲(niao)法(fa)(fa)(fa)和氨基(ji)酸(suan)法(fa)(fa)(fa)等，但(dan)(dan)是也需進(jin)行(xing)充(chong)分(fen)(fen)驗證(zheng)。“雙縮脲(niao)法(fa)(fa)(fa)是在(zai)行(xing)業(ye)標準(zhun)里列出的一(yi)個方(fang)(fang)(fang)法(fa)(fa)(fa)，但(dan)(dan)是在(zai)復(fu)雜基(ji)質里使用要進(jin)行(xing)充(chong)分(fen)(fen)的方(fang)(fang)(fang)法(fa)(fa)(fa)學(xue)驗證(zheng)。氨基(ji)酸(suan)法(fa)(fa)(fa)是把重組膠原蛋白水(shui)解成氨基(ji)酸(suan)，存在(zai)氨基(ji)酸(suan)水(shui)解效率(lv)的問(wen)題，還(huan)有檢測(ce)器靈(ling)敏度的問(wen)題，同樣(yang)需要進(jin)行(xing)方(fang)(fang)(fang)法(fa)(fa)(fa)學(xue)驗證(zheng)，另外還(huan)要考慮(lv)如(ru)何(he)去(qu)除復(fu)雜基(ji)質的干(gan)擾問(wen)題。”
她強調(diao)，只有建立了(le)方法學驗證后(hou)的(de)技術(shu)標準(zhun)才能確保檢(jian)測結果的(de)可信性。
成分檢測亟需標準
共促行業有序發展
值得關注的(de)是，對(dui)重組(zu)膠(jiao)原蛋白進行(xing)準確(que)檢(jian)測(ce)是一個高度(du)復雜的(de)過(guo)程，特別是在(zai)護膚品成分這類“復雜基(ji)質(zhi)”中，未(wei)經完整(zheng)鏈路(lu)的(de)檢(jian)測(ce)驗證，其數據往(wang)往(wang)缺乏參考價值。 正(zheng)因如此，行(xing)業亟需凝聚多方力(li)量，共(gong)同推動(dong)科(ke)學(xue)、統(tong)一的(de)國家標(biao)準的(de)建(jian)立(li)與出臺，有效規避因檢(jian)測(ce)標(biao)準缺失而(er)導致(zhi)的(de)功效成分含量不明確(que)等問題，保障消費者權益，并最終助力(li)重組(zu)膠(jiao)原蛋白產業健康(kang)、可持(chi)續發展。
*數(shu)據(ju)引自新(xin)華網報(bao)道研討會專家(jia)共識
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